【胶原酶】胶原酶用于瘢痕治疗时的注意事项

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【胶原酶】胶原酶用于瘢痕治疗时的注意事项

2020-10-27币圈百科694

【胶原酶】中文名称:Collagenase I型、II型、【胶原酶】IV型、v型英文名称:collage nase I、Collagenase II、Collagenase IV、Collagenase VCAS编号336090000胶原酶仅对细胞间质有消化作用,对上皮细胞几乎没有影响。因此,适合纤维性组织、上皮和癌症组织的消化,将上皮细胞从胶原蛋白成分中分离出来,【胶原酶】防止损伤。常用剂量为*钟浓度200U/ml(约1毫克/毫升)或0.03%至0.3%。胶原酶分为、类型和肝细胞专用胶原蛋白,应根据要消化的组织类型胶原蛋白进行选择。

分类品牌(产地)编号规格详细Collagenase I型Sigma-0130100MG/1G主要用于上皮、肺【胶原酶】、脂肪和肾上腺组织细胞的分离。Invitrogen 17100-017100MG/1 Gcollagenase II(胶原酶II型)sigmaC-6885100mg/1g适用于肝、骨、甲状腺、心脏和涎腺组织细胞的分离。Invitrogen 17101-015100MG/1 Gcollagenase【胶原酶】 IV(胶原酶IV型)Sigma-5138100MG/1G胶原蛋白中至少含有7种中短程白质酶成分。分子量68 Invitrogen 17104-019100MG/1 Gcollagenase V型Sigma-9263100MG/1G胶原蛋白至少含有7中肠蛋白酶成分,分子量可用于68-胰腺组织的分离。注:I型胶原酶或分子粒子比胰酶大,【胶原酶】不易过滤,因此可以用素食过滤器过滤**。

“粗”胶原酶。MacLennan,Mandl,Howes 1953年首次提出的发酵及纯化过程首先被Sigma-Aldrich采用,最终得到改善,以产生更高的活性产品。“粗”胶原酶意味着这种物质实际上是混合物,除了胶原酶外,【胶原酶】还有多种酶共同作用,分解组织。据悉,目前存在两种形式的胶原酶。除了一些例外,目前不同的商业胶原酶都是由龙组织梭菌制造的,或者是复制自用组织梭菌基因的大肠杆菌表达的重组形式。

Sigma-Aldrich胶原酶产品描述

下表中不同的胶原酶产品是Sigma-Aldrich开发的,【胶原酶】与其他产品相比,某些类型的组织(肌肉、胰腺、心脏、心脏)。除了遵守酶活性参数外,许多Sigma-Aldrich胶原酶产品的放置还需要在老鼠的其他组织中通过消化测试。被描述为“细胞培养验证”的部分产品经过哺乳动物细胞系的进一步测试,确认没有细胞毒性。

部分人气胶原酶产品的0.2毫米无菌过滤板也列在下面。

Sigma-Aldrich的纯化胶原酶产品只有微量酪蛋白酶(蛋白质水解酶)或梭菌蛋白酶活性。【胶原酶】纯化的VII型胶原酶也提供经过细胞培养验证的版本和无菌过滤版本。

钙、镁离子、血清成分对胶原酶的消化作用没有影响,可以用BSS(如D-hanks或PBS)或含有血清的培养液配制。【胶原酶】胶原酶的使用1。冲洗整理后的组织切成1~2毫米左右的小块。2.将组织块放入离心管(三角形烧瓶),放入体积为30~50倍的胶原酶溶液,转动盖子(密封烧瓶)。3.如果可以将烧瓶放在37的水浴或37的保温箱中,最好每3min摇晃一次,放在37的恒温频率组中【胶原酶】。消化时间与组织的种类有很大关系。部分肿瘤组织或其他致密结合组织的消化时间为4~48h,容易消化的组织的37振动能消化15~45min,视情况而定。组织块分散,块的形状消失后,一旦动摇,就可以认为是细胞团或单个细胞,【胶原酶】足以消化。上皮组织通过胶原酶消化后,【胶原酶】上皮细胞对这种酶有抵抗力,因此一些细胞团可能不会完全分散,但同时,MOIN上皮细胞比分散的单个上皮细胞长得更好。因此,如果没有特别的要求,就不必再处理了。4.收集消化液(有时个别组织块和未充分消化的组织屑要用100颈不锈钢网过滤),离心1000r/min,5min,去除上清,用汉克液或无血清培养液离心冲洗1~2次,去除上清,加入培养液,制成细胞悬液


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