【琼脂糖凝胶】琼脂糖凝胶电泳结果分析
【琼脂糖凝胶】琼脂糖凝胶电泳什么条件跑出来好看SDS电泳和琼脂糖电泳的区别
琼脂糖凝胶电泳什么条件跑出来好看
论文用的电泳图,【琼脂糖凝胶】什么条件跑出来好看?
比如电压多少【琼脂糖凝胶】,琼脂糖浓度多少?
EB浓度有影响吗?
等等,谢谢具体问题具体分析。
琼脂糖的浓度与待分离DNA的大小有关【琼脂糖凝胶】。
不同浓度适合不同大小的DNA。
一般规律是DNA越小,【琼脂糖凝胶】浓度越高。
电压低比较好,但不能保证电泳能在30-60分钟内完成。EB浓度影响不大【琼脂糖凝胶】,但需要电泳时浓度高不要紧,回收时要考虑EB浓度。
天使关怀的具体问题(站内联系TA)要考虑。【琼脂糖凝胶】琼脂糖浓度的最佳线性DNA分辨率范围(BP)
SDS电泳和琼脂糖电泳的区别
和琼脂糖凝胶电泳使用完全不同的凝胶材料。【琼脂糖凝胶】SDS-PAGE用的是聚丙烯酰胺,是化学反应形成的凝胶。
琼脂糖凝胶是一种物理反应(加热融化,冷却冷冻)。通常我们用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质,琼脂糖凝胶电泳分离核酸。
当然,这不是绝对的。如果要区分碱基数相近的核酸片段,我们也会用到聚丙烯酰胺凝胶电泳,【琼脂糖凝胶】比如DNA测序反应中的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
至于琼脂糖凝胶为什么不用两种不同浓度的凝胶,其实跟SDS-PAGE和琼脂糖凝胶电泳的方向有关。SDS-PAGE是垂直凝胶,电泳取样孔与电泳方向平行,肯定会造成样品分布不均。
因此,预电泳需要高浓度凝胶,以确保分离凝胶时所有蛋白质处于同一水平。而在琼脂糖凝胶电泳中【琼脂糖凝胶】,凝胶是水平的,样品孔的方向垂直于凝胶方向,因此样品在电泳中不会导致水平的不同。
所以不需要两种不同浓度的凝胶。
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