【阿尔玛蓝】阿尔玛蓝实验结果确定

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【阿尔玛蓝】阿尔玛蓝实验结果确定

2020-10-08BTC化工百科729

【阿尔玛蓝】Alamar Blue是氧化还原指示剂,可以根据代谢活性产生亮度变化和荧光信号。【阿尔玛蓝】这是一种安全无毒的染料,可用于细胞活性和细胞增殖的定量分析、细胞因子生物测定和体外细胞毒性研究,有效测定动物、真菌和细菌细胞的天然代谢活性。

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Alamar Blue是氧化状态下呈现紫色非物质光性,【阿尔玛蓝】还原状态下变成粉红色或红色荧光的还原产物,【阿尔玛蓝】反映正在研究的细胞或微生物的氧分子消耗,因此经常用作氧化还原指示剂,显示观察到的细胞和细菌的代谢活动。

该测量基于具有新陈代谢活性的细胞转换为试剂荧光和有色指示剂的能力。在细【阿尔玛蓝】胞增殖过程中,细胞内NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN、NADH/NAD的比例提高,处于恢复环境。摄取细胞内染料被这些代谢中间体及细胞色素类还原,释放到细胞外,溶解在培养基中,由无荧光的青蓝色变成有荧光的粉红色。损伤和非活性细胞的天然代谢活性较低,因此相应的信号较低。

可以用普通分光光度计或荧光光度计检测530 ~ 560NM之间的发光波长为590 nm。吸光度和荧光强度与活性细胞的数量成正比。该产品可广泛用于细胞增殖代谢、药物的细胞毒性作用的体外测定、医院微生物的快速检查和鉴定。【阿尔玛蓝】Alamar Blue比Taipanlan、TTC、MTT、MTS等分析方法具有更多优势。Alamar Blue可以使用单一试剂方式持续快速检测细胞增殖状态。

Alamar Blue的特点是操作简单,几乎不干扰细胞正常代谢,因为它对细胞无毒性,无害,不会影响细胞抗体合成和分泌等,因此可以持续观察同一一批细胞的增殖状态,观察更多的实验。注1)客户必须亲自准备100%的利夫洛托型Alamar Blue试剂。

另外,为了获得原型Alamar Blue,需要调配Alamar Blue和细胞培养器的混合溶液。Alamar Blue和细胞培养器的比例为1336010,高压灭菌15min。(不能用浓缩的Alamar Blue高压灭菌或PBS制作溶液。这是因为100%的Liprototype Alamar Blue在PBS中不稳定。)2)为了获得最佳结果,建议在实验前探索孵化时间和接种细胞的数量。3)适当密度的细胞可以增加检测灵敏度。96孔板的情况下,建议每个孔接种100毫升细胞。

细胞浓度范围为100-10,000/孔,悬浮细胞为2,000-50,000/孔,培养基为空白。384孔板的情况下,细胞浓度和接种量都减少了一半。4)微生物污染物也可以还原试剂检测,影响实验结果,因此整个过程必须是无菌操作。5)请注意接种细胞浓度和添加检查试剂后孵化时间。如果细胞浓度过高或孵化时间过长,会引起继发性恢复反应,使无色和荧光消失。6)孵化时一定要避光。7)本产品可以用荧光或分光光度计检测,但荧光的灵敏度高,实验误差小,因此建议使用荧光检查。

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