【lb培养基配方】lb培养基配方及作用
【lb培养基配方】材料:
LB培养基(1%蛋白胨、1%氯化钠【lb培养基配方】0.5%酵母提取物、1.2%琼脂)50mL细菌培养皿三种氨苄青霉素是Amp(或其他抗生素如Kana,【lb培养基配方】只有抗性基因发生变化)大肠杆菌DH5a工程菌
OD约为0.6-0.8。
另一株转移到没有类似长度的氨苄青霉素抗性基因的质粒【lb培养基配方】,是氨苄青霉素抗性株大肠菌,以下简称Amp-s(Ampicillinsensitive),【lb培养基配方】采集了200L。
(细菌密度:
OD约0.6-0.8)程序:
以下所有操作都在干净长椅上进行。
1.垫板对LB培养基进行湿热高压灭菌【lb培养基配方】,分别在3个培养皿中各放10mL,号码是a、b、c。
2.加入抗生素未凝固前【lb培养基配方】在a、b盘中加入浓度100g/mL的氨苄青霉素,在c中不加入3.接种实验组。
在a盘上用涂布法接种Amp-r菌种100L阴性对照:
在b盘上涂布100LAmp-s菌种阳性对照并接种:
向c盘接种【lb培养基配方】100LAmp-s菌种以上操作都在清洁台上进行。
在37度恒温培养箱中培养12-16h,得出了观察菌落生成的理论上期待的实验结果。
实验组a盘和阳性对照组c盘繁殖大量菌落,阴性对照组b盘无菌落或仅生长极个别的1、【lb培养基配方】2个菌落(仍有因自发变异而抗氨苄青霉素的可能性)。
证明:
抗生素可以有效抑制敏感菌株的生长,但抗性菌株无效。答案都是本人根据实验经验手工写的,原创。
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